Kluczowa różnica - HPLC vs LCMS
Przyjrzyjmy się najpierw znaczeniu HPLC i LCMS, zanim przeanalizujemy różnicę między HPLC i LCMS. Chromatografia jest techniką rozdzielania w analizie chemicznej, w której składniki próbki są oddzielane podczas przejścia przez medium chromatograficzne. Obejmuje również interakcję z próbką, fazą stacjonarną i fazą ruchomą. HPLC oznacza wysokosprawną chromatografię cieczową i jest stosowana jako metoda chromatografii cieczowej w chemii analitycznej. Połączenie chromatografii cieczowej i spektroskopii masowej (LCMS) zostało opracowane do analizy ilościowej wybranych biocząsteczek i jest bardzo czułą, dokładną i specyficzną procedurą testową w porównaniu z HPLC. To jest kluczowa różnica między HPLC i LCMC. Ten artykuł wprowadzi Cię w HPLC i LCMC, które zajmują się analizą chemiczną i omówią różnice między HPLC i LCMS.
Co to jest HPLC?
Wysokosprawna chromatografia cieczowa (HPLC) jest popularną techniką separacji w chemii analitycznej. Służy głównie do oddzielania składników, identyfikacji i ilościowego określania każdego składnika mieszaniny. Wcześniej metoda ta była znana jako wysokociśnieniowa chromatografia cieczowa, ponieważ polegała na pompach do przepływu ciekłego rozpuszczalnika pod ciśnieniem zawierającego mieszaninę próbek przez kolumnę wypełnioną stałym materiałem adsorbującym. Każdy składnik mieszaniny próbki inaczej oddziałuje ze stałym materiałem adsorbującym, co powoduje różne szybkości przepływu dla różnych składników. Może to prowadzić do rozdzielenia składników podczas wypływu z kolumny HPLC.
HPLC jest używana do różnych zastosowań, takich jak analiza poziomu witaminy D we krwi, nielegalne zażywanie narkotyków przez sportowców poprzez wykrywanie pozostałości leków w ich moczu, sortowanie składników złożonej próbki biologicznej do celów badawczych oraz analizy i produkcja leków.
Co to jest LCMS?
Chromatografia cieczowa - spektrometria mas (LCMS) jest techniką analityczną, która łączy fizyczne zdolności rozdzielania chromatografii cieczowej ze zdolnościami analizy masowej spektrometrii mas (MS). Chromatografia cieczowa jest techniką separacji, a spektrometria mas służy do analizy stosunku masy do ładunku naładowanych cząstek. Fizyczną separację zwykle osiąga się za pomocą HPLC i alternatywnie LCMS, znanego również jako HPLC-MS. LCMS to dominująca technika analityczna o bardzo wysokiej dokładności, czułości i swoistości w porównaniu z HPLC. W związku z tym jest przydatny w wielu zastosowaniach, takich jak cele badawcze, analiza leków, analiza żywności itp. LCMS jest używany głównie do oddzielania, wykrywania, identyfikowania i ilościowego określania właściwości biochemicznych określonej próbki w obecności złożonych mieszanin chemicznych.
Jaka jest różnica między HPLC a LCMC?
Akronim i definicja HPLC i LCMC
HPLC: HPLC oznacza wysokosprawną chromatografię cieczową. Jest to technika rozdzielania stosowana głównie do rozdzielania składników, identyfikacji i ilościowego określania każdego składnika w mieszaninie.
LCMS: LCMS oznacza Liquid Chromatography and Mass Spectrometry. Jest to technika analityczna, która łączy w sobie fizyczne zdolności separacji chromatografii cieczowej ze zdolnościami analizy masowej spektrometrii mas (MS).
Charakterystyka HPLC i LCMC
Klasyfikacja
HPLC: jest to tylko metoda chromatografii cieczowej.
LCMS: Jest to połączenie metody chromatografii cieczowej i metody spektrometrii mas.
Wydajność
HPLC: W porównaniu z LCMS analiza HPLC jest mniej wydajna i wolniejsza.
LCMS: W porównaniu z HPLC, analiza LCMS jest wydajna i szybsza.
Wrażliwość
HPLC: W porównaniu z LCMS, analiza HPLC jest mniej czuła.
LCMS: W porównaniu z HPLC, analiza LCMS jest bardziej czuła.
Specyficzność
HPLC: W porównaniu z LCMS, analiza HPLC jest mniej specyficzna.
LCMS: W porównaniu z HPLC, analiza LCMS jest bardziej szczegółowa.
Precyzja
HPLC: HPLC daje mniej dokładne wyniki niż LCMS do oznaczania niektórych chemikaliów.
LCMS: LCMS daje dokładniejsze wyniki niż HPLC do oznaczania niektórych chemikaliów.
Składnik
HPLC: HPLC można uznać za składnik LCMS.
LCMS: LCMS nie może być traktowane jako składnik HPLC.
Źródło jonów
HPLC: źródło jonów nie istnieje w urządzeniu HPLC.
LCMS: źródło jonów jest obecne w instrumencie LCMS.
Aplikacje
HPLC: jony, polimery, cząsteczki organiczne i biocząsteczki można analizować za pomocą HPLC.
LCMS: można analizować cząsteczki organiczne i biocząsteczki. W przeciwieństwie do HPLC, LCMS można stosować do badania niecałkowicie rozdzielonych mieszanin.
Operacja
HPLC: Schemat urządzenia HPLC przedstawiono na rysunku 1 i zwykle obejmuje on automatyczny podajnik próbek, pompy i detektor. Próbnik wprowadza mieszaninę próbki do fazy ruchomej (pod ciśnieniem mieszanina rozpuszczalników, takich jak woda, acetonitryl i / lub metanol), która przenosi ją do kolumny. Pompy zapewniają żądany przepływ i skład fazy ruchomej przez kolumnę. Kolumna jest wypełniona adsorbentem, który jest ziarnistą stałą cząstką, taką jak krzemionka lub polimery. Detektor wytwarza sygnał proporcjonalny do ilości składnika próbki obecnego w kolumnie, umożliwiając tym samym wymierną analizę wybranych składników próbki. Urządzenie HPLC jest kontrolowane, a analiza danych jest zapewniana przez cyfrowy mikroprocesor i oprogramowanie użytkownika.
Rysunek 1: Schemat urządzenia HPLC
LCMS: Schemat aparatu LCMS przedstawiono na rysunku 2. Ekstrakt próbki jest wprowadzany do kolumny składającej się z HPLC. Ta kolumna zachowuje metabolity próbki w oparciu o cechy fizyczne, a różne metabolity przepływają do spektrometru mas w różnych odstępach czasu. Spektroskopia mas służy do oceny mas cząstek, określenia elementarnego uporządkowania cząsteczki oraz wyjaśnienia struktury cząsteczki. Jednak próbkę należy zjonizować, aby wygenerować naładowane cząsteczki w celu określenia ich stosunku masy do ładunku. Dlatego zamiast instrumentów HPLC LCMS składa się z dodatkowych trzech modułów, takich jak źródło żelaza, analizator masy i detektor. Źródło jonów może przekształcić próbkę fazy gazowej w jony, a analizator mas grupuje jony według ich mas przy użyciu pól elektromagnetycznych. Wreszcie,detektor określa ilościowo wartości i dostarcza dane dotyczące każdego jonu obecnego w próbce. Technika LCMS może być stosowana zarówno do zastosowań jakościowych, jak i ilościowych.
Rysunek 2: Schemat instrumentu LCMS
Podsumowując, HPLC jest metodą chromatografii cieczowej, podczas gdy LCMS jest połączeniem chromatografii cieczowej i spektrometrii mas. Obie te techniki analizy mają różne cechy, ale można je wykorzystać do identyfikacji i ilościowego określenia składu żywności, farmaceutyków i innych bioaktywnych cząsteczek.
