Różnica Między Nitrocelulozą A Membraną Nylonową

2024 Autor: Mildred Bawerman | [email protected]. Ostatnio zmodyfikowany: 2023-12-16 08:41

Kluczowa różnica - membrana nitrocelulozowa vs nylonowa

Blotting jest ważną techniką wykrywania określonych sekwencji DNA, RNA i białek z ich mieszanin w biologii molekularnej. Odbywa się to za pomocą membrany zwanej blot. Istnieją różne techniki blottingu, takie jak blotting północny, południowy i zachodni. Wyboru właściwej membrany do procesu blottingu należy dokonać ostrożnie, aby zapobiec niespecyficznemu wiązaniu i niewłaściwemu wykrywaniu. Nitroceluloza, nylon i PVDF to powszechnie stosowane membrany w technikach blottingu. Mają różne cechy. Kluczowa różnica między membraną nitrocelulozową a nylonową polega na tym, że membrany nitrocelulozowe mają wysoki potencjał immobilizacji białek, podczas gdy membrany nylonowe mają wysoki potencjał unieruchamiania kwasu nukleinowego. Jednak oba typy membran są często używane w technikach blottingu.

SPIS TREŚCI

1. Przegląd i kluczowe różnice

2. Co to jest membrana nitrocelulozowa

3. Co to jest membrana nylonowa

4. Porównanie obok siebie - membrana nitroceluloza i nylon

5. Podsumowanie

Co to jest membrana nitrocelulozowa?

Membrana nitrocelulozowa jest powszechnie stosowanym filtrem membranowym w technikach blottingu kwasów nukleinowych i białek. Posiada duży potencjał wiązania białek. W związku z tym błony nitrocelulozowe są szeroko stosowane w technice western blot. Błony nitrocelulozowe są kompatybilne ze wszystkimi technikami hybrydyzacji i wykazują doskonałe zdolności wiązania bez zakłóceń. Membrany nitrocelulozowe mają naturę hydrofilową. Dokonują hydrofilowych interakcji z cząsteczkami i skutecznie unieruchamiają je na membranie. Handlowe membrany nitrocelulozowe są dostępne w dwóch rozmiarach porów: 0,45 i 0,2 µm.

Rysunek 01: Membrana nitrocelulozowa stosowana w western blotting

Co to jest membrana nylonowa?

Membrana nylonowa to kolejny rodzaj komercyjnej membrany stosowanej w technikach blottingu. Jest alternatywnie stosowany z membranami nitrocelulozowymi do blottingu południowego i północnego. Membrany nylonowe są idealne do południowego blottingu niż nitroceluloza ze względu na ich wysokie powinowactwo do wiązania z DNA. Ze względu na kilka unikalnych cech membran nylonowych, naukowcy często używają membran nylonowych do blottingu południowego i północnego zamiast membrany nitrocelulozowej. Membrany nylonowe są również zalecane do usuwania i ponownego sondowania, w przeciwieństwie do nitrocelulozy.

Ryc. 02: Membrana nylonowa używana do południowego blottingu

Jaka jest różnica między membraną nitrocelulozową a nylonową?

Porównaj środek artykułu przed tabelą

Nitroceluloza a membrana nylonowa
Membrany nitrocelulozowe są kruche.	Membrany nylonowe są mniej kruche.
Obsługa
Są trudne w obsłudze.	Są łatwe w obsłudze.
Potępienie
Niepodparte membrany nitrocelulozowe są trudne do ponownego sondowania.	Sondowanie jest łatwe dzięki nylonowym membranom.
Zgodność z różnymi warunkami przechowywania
Membrany nitrocelulozowe mają mniejszą wytrzymałość, aby wytrzymać różne warunki przechowywania.	Membrany nylonowe lepiej reagują na różne warunki przechowywania.
Posługiwać się
Wymagane jest wstępne zwilżenie.	W przypadku membran nylonowych wstępne zwilżanie nie jest wymagane.
Charakter hydrofilowy
Membrany nitrocelulozowe są z natury hydrofilowe, ale są mniej hydrofilowe niż membrany nylonowe.	Charakteryzują się silną hydrofilowością.
Potencjał unieruchomienia
Błony nitrocelulozowe mają mniejsze powinowactwo do kwasów nukleinowych. Ale ma duże powinowactwo do białek.	Membrany nylonowe mają duży potencjał wiązania z kwasami nukleinowymi niż membrany nitrocelulozowe.

Podsumowanie - Nitroceluloza a membrana nylonowa

Membrany nitrocelulozowe i nylonowe to specjalne arkusze używane w technice blottingu do odtwarzania wzoru pasm na żelu. Dają możliwość wykrycia określonej sekwencji lub białka z mieszanin poprzez ich immobilizację na membranie. Po unieruchomieniu cząsteczek na membranie można je wykorzystać jako substrat do analizy hybrydyzacji ze znakowanymi sondami. Membrana nitrocelulozowa jest powszechnie stosowana do wykrywania białek w technice western blot ze względu na jej wysokie powinowactwo wiązania z białkami. Membrany nylonowe są często używane do blottingu południowego i północnego. Na tym polega różnica między membraną nitrocelulozową a nylonową.