Kluczowa różnica - CFU vs MPN
Jednostka tworząca kolonię (CFU) i Najbardziej prawdopodobna liczba (NPL) to dwie metody stosowane do wyliczania mikroorganizmów w próbkach. Oba parametry służą do wykrywania jakości wody i bakterii wskaźnikowych kału w próbkach wody. Jednostka tworząca kolonie jest miarą stosowaną do wyliczenia liczby żywotnych komórek bakteryjnych lub komórek grzybów w określonej objętości lub wadze danej próbki. Standardową jednostką tego parametru jest CFU / ml lub CFU / g. Najbardziej prawdopodobna liczba to kolejna jednostka używana do pomiaru liczby żywotnych komórek bakteryjnych w próbce cieczy. Kluczowa różnica między CFU i MPN polega na tym, że CFU oblicza się na podstawie kolonii bakterii i grzybów rosnących na stałej płytce agarowej, podczas gdy MPN oblicza się na podstawie żywych bakterii rosnących w płynnym podłożu.
ZAWARTOŚĆ
1. Przegląd i kluczowe różnice
2. Co to jest CFU
3. Co to jest MPN
4. Porównanie bezpośrednie - CFU vs MPN w formie tabelarycznej
5. Podsumowanie
Co to jest CFU?
Jednostka tworząca kolonie (CFU) to parametr, który mierzy liczbę żywotnych komórek bakterii lub grzybów w danej próbce. Metoda zliczania jednostek tworzących kolonie jest określana jako standardowa liczba płytek. Żywotne kolonie, które pojawiają się na płytkach agarowych, są wyrażane jako CFU na 1 ml (jednostka tworząca kolonie na mililitr) próbki dla cieczy lub CFU na 1 g (jednostka tworząca kolonie na jeden gram) próbki dla ciał stałych.
Istnieją dwie popularne metody pomiaru CFU w próbce. Są to metoda płytkowa i płytkowa. Te dwie metody są obsługiwane przez technikę zwaną seryjnym rozcieńczaniem. Szeregowo rozcieńczone próbki umożliwiają uzyskanie policzalnej liczby kolonii na powierzchni agaru. Próbkę o znanej objętości można rozprowadzić na powierzchni płytki agarowej lub zmieszać z agarem i przelać na płytkę. Płytkę następnie inkubuje się i zlicza powstałe kolonie. Liczba kolonii odnosi się do liczby mikroorganizmów w pierwotnej próbce. Płytki, które pokazują zbyt wiele kolonii lub zbyt mało kolonii, są wyłączone z liczenia, ponieważ wyniki na tych płytkach mogą nie być statystycznie dokładne. Statystycznie najlepszy zakres to 30 - 300 kolonii na szalce agarowej. Dlatego w celu dokładnego wyliczenia należy wybrać właściwe płytki. W przypadku powyższej funkcji wykonuje się rozcieńczenie seryjne.
Po policzeniu liczby żywotnych kolonii na płytkach, CFU / ml można obliczyć, korzystając z następującego równania.
CFU na ml oryginalnej próbki = liczba kolonii na płytce X współczynnik rozcieńczenia
Współczynnik rozcieńczenia = (1 / rozcieńczenie płytki)
Na przykład, jeśli uzyskasz 149 kolonii na płytce z rozcieńczeniem 10-4, to liczbę bakterii w 1 ml oryginalnej próbki można obliczyć w następujący sposób:
CFU / ml = (149) x (1/10 -4)
= 149 × 10 4 lub 1490000
= 1,49 x 10 6
Rysunek 01: Jednostka tworząca kolonie
Co to jest MPN?
Najbardziej prawdopodobna liczba jest miarą alternatywną dla CFU / ml. MPN szacuje również żywotność komórek w próbce cieczy. Zlicza organizmy rosnące w płynnej kulturze i jest głównie techniką bakteriologiczną. Ta metoda jest szczególnie przydatna w przypadku próbek, które zawierają niskie stężenia komórek bakteryjnych; na przykład mleko, woda pitna itp. Wartość NPL jest wyrażona dla 100 ml objętości. MPN opiera się na metodzie statystycznej opartej na teorii prawdopodobieństwa. Istnieją tabele statystyczne przeznaczone do wyznaczania wartości NPL na 100 ml próbki. Tabele te pokazują wyniki przy 95% przedziale ufności.
Wartość MPN jest obliczana po wykonaniu techniki zwanej metodą fermentacji wieloprzewodowej. Trzy zestawy probówek zawierających odpowiednią pożywkę hodowlaną zaszczepia się trzema różnymi objętościami próbki, takimi jak 10 ml, 1 ml i 0,1 ml i inkubuje w celu wzrostu. Po okresie inkubacji probówki ocenia się + (dodatni) lub - (ujemny) na obecność lub brak wzrostu. Wzór wyników pozytywnych i negatywnych jest następnie porównywany z tabelą MPN statystycznych prawdopodobieństw w celu oszacowania liczby mikroorganizmów. Następnie podaje się wartość NPL dla 100 ml próbki. MPN jest szeroko stosowany do wykrywania bakterii z grupy coli obecnych w próbkach wody.
Rysunek 02: Tabela MPN
Jaka jest różnica między CFU a MPN?
Porównaj środek artykułu przed tabelą
CFU vs MPN |
|
| CFU to miara używana do wyrażenia liczby żywotnych kolonii bakterii lub grzybów w danej próbce. | MPN jest alternatywną miarą CFU i mierzy liczbę żywotnych komórek bakteryjnych w próbce cieczy. |
| Jednostka | |
| CFU / ml lub CFU / g | MPN / 100 ml |
| Obliczenie | |
| CFU oblicza się, licząc liczbę kolonii wyrosłych na płytkach agarowych. | NPL jest obliczana poprzez porównanie dodatnich i ujemnych wzorów probówek z tabelą statystyczną NPL. |
| Technika seryjnego rozcieńczania | |
| Przed umieszczeniem próbek na płytkach agarowych wykonuje się seryjne rozcieńczenia. | Podczas obliczania NPL zwykle nie wykonuje się rozcieńczania seryjnego |
| Metody | |
| Metoda posiewu płytowego i metoda płytki wysypowej to dwa rodzaje metod stosowanych do uzyskania CFU. | Fermentacja w wielu probówkach to metoda stosowana w celu uzyskania wartości MPN. |
Podsumowanie - CFU vs MPN
Pomiar wzrostu mikroorganizmów jest wymagany z wielu powodów. W zakładach przetwórstwa spożywczego konieczne jest mierzenie poziomu i rodzaju mikroorganizmów w żywności. W przemyśle spożywczym i medycynie konieczne jest zapewnienie skutecznego wykonywania zabiegów sterylizacyjnych. W oczyszczalniach ścieków wymagane jest rutynowe oznaczanie drobnoustrojów. Podczas optymalizacji procedury w biologii molekularnej wymagany jest pomiar liczby kolonii na płytkach. W związku z tym dostępne są różne metody wyliczania i pomiaru wzrostu. CFU i MPN to dwie takie metody szeroko stosowane w różnych dziedzinach. CFU jest miarą liczby żywotnych kolonii bakterii i grzybów obecnych w danej próbce. Oblicza się go przy użyciu standardowej metody liczenia drobnoustrojów lub metody liczenia żywotnych bakterii. MPN to kolejna miara wyrażająca liczbę komórek bakteryjnych obecnych w danej objętości próbki cieczy. Jest obliczany przy użyciu metody fermentacji wieloprzewodowej i tabeli MPN. To jest różnica między CFU a MPN.
Pobierz wersję PDF CFU vs MPN
Możesz pobrać wersję PDF tego artykułu i używać jej w trybie offline, zgodnie z notami cytowania. Proszę pobrać wersję PDF tutaj Różnica między CFU a MPN.
