Kluczowa różnica - barwienie metodą Grama a kultura
Barwienie metodą Grama jest techniką barwienia wykonywaną w celu rozróżnienia bakterii na dwie grupy w zależności od grubości warstwy peptydoglikanu w ich ścianie komórkowej. Kultura to metoda hodowli i utrzymywania mikroorganizmów w warunkach laboratoryjnych do różnych analiz. Kluczową różnicą między plamą w gramach a kulturą jest ich funkcja; gram szczep technika barwienia bakterii, w której hodowla jest metodą namnażania i utrzymywania mikroorganizmów.
SPIS TREŚCI
1. Przegląd i kluczowe różnice
2. Co to jest barwienie metodą Grama
3. Co to jest kultura
4. Porównanie bezpośrednie - barwienie metodą Grama a kultura
5. Podsumowanie
Co to jest barwienie metodą Grama?
Barwienie metodą Grama jest ważną techniką barwienia różnicowego stosowaną do identyfikacji bakterii w mikrobiologii. Technika ta została wprowadzona przez duńskiego bakteriologa Hansa Christiana Grama w 1884 roku. Barwienie metodą Grama dzieli bakterie na dwie główne grupy: gram dodatnią i gram ujemną; są one bardzo ważne w klasyfikacji i identyfikacji bakterii. Barwienie metodą Grama jest pierwszym etapem charakteryzacji bakterii.
Bakterie pogrupowano na podstawie różnic w ich ścianie komórkowej. Bakterie Gram-dodatnie zawierają grubą warstwę peptydoglikanu w ścianie komórkowej, podczas gdy bakterie Gram-ujemne zawierają cienką warstwę peptydoglikanu w ścianie komórkowej, jak pokazano na ryc. 01. Wynik barwienia metodą Grama będzie oparty na różnicy grubości warstwy peptydoglikanu w Ściana komórkowa.
Rysunek 1: Bakterie Gram-dodatnie i Bakterie Gram-ujemne
Barwienie w gramach przeprowadza się przy użyciu czterech różnych odczynników, a mianowicie; bejca pierwotna, zaciekająca, odbarwiająca i kontrastowa. Fiolet krystaliczny i safranina służą odpowiednio jako barwienie pierwotne i przeciwdziałać, a gramy jodu i 95% alkoholu służą odpowiednio jako zaprawa i odbarwiacz.
Podstawowe kroki w plamie Grams
- Na czystym szkiełku przygotowuje się rozmaz bakteryjny, utrwala na gorąco i chłodzi.
- Rozmaz jest zalewany fioletem krystalicznym na 1 - 2 minuty.
- Smar spłukuje się wolno bieżącą wodą z kranu, aby usunąć nadmiar plam.
- Jod w gramach jest nakładany na rozmaz przez 1 minutę.
- Rozmaz spłukuje się wolno bieżącą wodą z kranu
- Rozmaz jest myty 95% alkoholem przez 2 - 5 sekund i spłukiwany wolno bieżącą wodą z kranu.
- Rozmaz jest barwiony kontrastowo safraniną przez 1 minutę
- Rozmaz spłukuje się wolno bieżącą wodą wodociągową, suszy i obserwuje pod mikroskopem.
Pod koniec barwienia gramami bakterie gramujemne będą obserwowane w kolorze różowym, podczas gdy bakterie gram-dodatnie będą obserwowane w kolorze fioletowym, jak pokazano na rysunku 02. O wyniku barwienia w gramach decyduje grubość warstwy peptydoglikanu w ich ścianę komórkową. Podczas etapu odbarwiania pierwotne zabarwienie i zaprawa są łatwo usuwane z bakterii Gram-ujemnych i stają się bezbarwne, ponieważ mają cienką warstwę peptydoglikanu. Pierwotne zabarwienie jest zatrzymywane w gramach bakterii dodatnich, ponieważ mają one grubą warstwę peptydoglikanu. Barwienie kontrastowe nie będzie skuteczne w przypadku bakterii dodatnich w gramach z powodu zatrzymywania pierwotnego zabarwienia. Zatem gramy bakterii dodatnich będą widoczne w podstawowym kolorze plamki, tj. W kolorze fioletowym. Barwienie kontrastowe zabarwi bakterie Gram ujemne i będzie widoczne w kolorze pick, którym jest kolor safraniny. W związku z tym łatwo jest podzielić bakterie na dwie grupy według barwienia Grama i jest to cenne w różnicowaniu i identyfikacji bakterii.
Rysunek 2: Szczep Grama
Co to jest kultura?
Hodowla drobnoustrojów to metoda hodowli i utrzymywania mikroorganizmów w warunkach laboratoryjnych do różnych celów. Kultury są hodowane na podłożach stałych, półstałych i płynnych w zależności od rodzaju i celu hodowli mikroorganizmu. Kulturom zapewnia się niezbędne składniki odżywcze i warunki wzrostu wymagane przez mikroorganizmy. Istnieją różne składniki pożywki, takie jak źródło energii, źródło węgla, źródło azotu, minerały, mikroelementy, woda, środek zestalający itp. Optymalną temperaturę, tlen i pH należy dostosować do rodzaju hodowanego mikroorganizmu.
Istnieją różne typy kultur drobnoustrojów; na przykład hodowla okresowa, kultura ciągła, kultura przeszywana, hodowla na płytkach agarowych, kultura bulionowa itp. W zależności od składu pożywki hodowlanej istnieją różne typy pożywek zwanych pożywkami syntetycznymi, półsyntetycznymi i naturalnymi. Kultury drobnoustrojów są przygotowywane w sterylnych warunkach w specjalnej komorze zwanej laminarnym przepływem powietrza. Podłoże hodowlane i naczynia szklane są sterylizowane przed zaszczepieniem żądanego mikroorganizmu. W odpowiednich sterylnych warunkach mikroorganizm docelowy jest przenoszony do wysterylizowanej pożywki i inkubowany w optymalnej temperaturze. Wewnątrz pożywki mikroorganizmy będą rosnąć i rozmnażać się dzięki dostarczonym składnikom odżywczym.
Ryc. 3: Hodowla bakterii na płytce
Jaka jest różnica między Grama Stain a Culture?
Porównaj środek artykułu przed tabelą
Grama a kultura |
|
| Szczep Grams to technika barwienia różnicowego stosowana do różnicowania i identyfikacji bakterii. | Hodowla drobnoustrojów to metoda hodowli mikroorganizmów w laboratorium. |
| składniki | |
| Wykorzystuje różne odczynniki, w tym dwa barwniki. | Wykorzystuje się do tego różne pożywki hodowlane, takie jak stałe, półstałe i płynne pożywki złożone ze składników odżywczych i innych niezbędnych warunków. |
| Podstawowe funkcje | |
| Pozwala to na podzielenie bakterii na dwie grupy: gramy ujemne i gramy dodatnie. | Pozwala to na namnażanie mikroorganizmów do różnych celów. |
| Baza | |
| Wynik barwienia metodą Grama opiera się na różnicach w warstwie peptydoglikanu ściany komórkowej. | Mikroorganizmy będą rosnąć i rozmnażać się w pożywce hodowlanej. |
| Wynik | |
| Bakterie o gramaturze ujemnej są widoczne w kolorze różowym, a bakterie o gramaturze ujemnej są widoczne w kolorze fioletowym. | Na płytkach można zobaczyć kolonie mikroorganizmów. Na podłożach płynnych mikroorganizmy występują w postaci zawiesiny. |
Podsumowanie - barwienie metodą Grama a kultura
Kultury drobnoustrojów są przygotowywane i utrzymywane w warunkach laboratoryjnych do różnych celów, takich jak przechowywanie, testowanie, oczyszczanie chemiczne itp. Barwienie w gramach to procedura barwienia, która rozróżnia bakterie na dwie główne grupy zwane bakteriami gramami ujemnymi i bakteriami dodatnimi w gramach. Dlatego różnica między barwnikiem w gramach a kulturą polega na tym, że barwienie w gramach jest techniką barwienia bakterii, podczas gdy kultura jest metodą hodowania i utrzymywania mikroorganizmów w laboratoriach.
