Kluczowa różnica - Transformanty a rekombinanty
Rekombinacja i transformacja to dwa kluczowe etapy inżynierii genetycznej, w których cechy organizmu są celowo modyfikowane poprzez manipulowanie jego materiałem genetycznym. Rekombinacja to proces, w którym obcy DNA jest włączany do genomu wektora i tworzy się cząsteczka rekombinowanego DNA. Transformacja to kolejny krok, w którym rekombinowana cząsteczka jest wprowadzana do organizmu gospodarza. Komórka gospodarza lub organizm ułatwia ekspresję rekombinowanej cząsteczki. Kluczowa różnica między transformantami a rekombinantami polega na tym, że transformanty to komórki lub organizmy, które przyjmują rekombinowaną cząsteczkę do środka i ułatwiają ekspresję, podczas gdy rekombinanty są wektorami, które umożliwiają wstawienie obcego DNA do jego genomu i transport do transformantów gospodarza w celu ekspresji.
SPIS TREŚCI
1. Przegląd i kluczowe różnice
2. Czym są transformanty
3. Czym są rekombinanty
4. Porównanie bezpośrednie - transformanty a rekombinanty
5. Podsumowanie
Co to są transformanty?
Transformanty to komórki lub organizmy, w których do ekspresji pobierany jest rekombinowany DNA. Bakterie są powszechnie wykorzystywane jako organizmy żywicielskie w inżynierii genetycznej, ponieważ są łatwe w hodowli, rozmnażaniu i obchodzeniu się z nimi w warunkach laboratoryjnych, a proces transformacji jest łatwy w porównaniu z innymi organizmami. Najpopularniejszą bakterią żywicielską używaną w inżynierii genetycznej jest bakteria E. coli.
Podczas procesu transformacji komórki gospodarza są indukowane do pobierania rekombinantów. Jednak niektóre komórki gospodarza nie pobierają rekombinowanych cząsteczek. Są znane jako nietransformanty, a komórki zawierające w sobie cząsteczki rekombinowanego DNA nazywane są transformantami. Selekcję transformantów spośród nietransformantów przeprowadza się przy użyciu markerów selekcyjnych w biologii molekularnej. Markery selekcyjne są wstawiane do genomu wektora razem z wstawką DNA. Powszechnie stosowanymi markerami selekcyjnymi są geny oporne na antybiotyki. Geny markerowe ułatwiają różnicowanie transformantów i kontynuują proces. Po procesie transformacji bakteria hoduje się w pożywce zawierającej antybiotyk. Tylko transformanty są zdolne do wzrostu na tej pożywce, ponieważ posiadają w sobie rekombinanty.
Po transformacji rekombinowanej cząsteczki DNA w organizmie gospodarza, obcy DNA może zostać zintegrowany z genomem komórki gospodarza lub pozostać niezintegrowany w cytoplazmie. Jednak ekspresja i replikacja obcego DNA zachodzi w organizmie gospodarza i prowadzi do pożądanego wyniku procesu.
Co to są rekombinanty?
Rekombinant to organizm lub komórka, która posiada rekombinowany genom zawierający obce DNA. Rekombinanty są wynikiem procesu inżynierii genetycznej. Są sztucznie konstruowane in vitro poprzez wstawianie interesujących genów i modyfikację genomu. Często plazmidy bakteryjne i bakteriofagi działają jako rekombinanty w inżynierii genetycznej. Ma chimerę różnych DNA. Rekombinowana cząsteczka DNA przenosi obcy DNA do organizmu gospodarza i sprawia, że ulega on ekspresji i tworzy pożądany produkt.
Rekombinowane cząsteczki są konstruowane przy użyciu endonukleaz restrykcyjnych i ligaz DNA. Pożądany fragment DNA jest oddzielany od pierwotnego organizmu i wstawiany do wektora w celu wytworzenia rekombinanta do transformacji. Cięcie interesującego genu i otwarcie organizmu wektora powinno być wykonane przy użyciu tego samego enzymu restrykcyjnego, aby stworzyć kompatybilne lepkie końce, aby połączyć je ze sobą. Po włączeniu obcego DNA do genomu wektora jest znane jako rekombinowana lub rekombinowana cząsteczka DNA.
Rysunek 02: Rekombinowany DNA
Jaka jest różnica między transformantami a rekombinantami?
Porównaj środek artykułu przed tabelą
Transformanty a rekombinanty |
|
| Transformanty to komórki zawierające w sobie cząsteczkę rekombinowanego DNA. | Rekombinanty to cząsteczki nośnika, które mają obcy DNA wstawiony do własnego genomu. |
| Ekspresja obcego DNA | |
| Są to komórki gospodarza zdolne do ekspresji rekombinowanego DNA. | Powinny być zdolne do samoreplikacji w organizmie żywiciela. |
| Wybór | |
| Komórki, które można łatwo hodować i namnażać, wybiera się jako komórki gospodarza. | Muszą być łatwe do wyodrębnienia i powinny zawierać wybieralne markery. |
Podsumowanie - Transformanty a rekombinanty
Transformanty to komórki lub organizmy zawierające w sobie cząsteczki rekombinowanego DNA. Rekombinanty to organizmy lub komórki, które przeszły rekombinację genetyczną i mają obce DNA w genomie. Komórki bakteryjne są często używane jako komórki gospodarza do transformacji, a plazmidy i bakteriofagi są często używane jako wektory w technologii rekombinacji DNA. To jest różnica między transformantami a rekombinantami.
