Kluczowa różnica - immunocytochemia a immunohistochemia
Immunocytochemia (ICC) i Immunohistochemistry (IHC) to dwie szeroko stosowane techniki w diagnostyce molekularnej, które identyfikują i potwierdzają występowanie zarówno chorób niezakaźnych, jak i zakaźnych na podstawie markerów molekularnych obecnych na komórkach. Kluczową różnicą w immunocytochemii i immunohistochemii jest cząsteczka, która jest stosowana jako procedura analizy w tych technikach. W ICC stosuje się przeciwciała pierwotne i wtórne skoniugowane z markerami, takimi jak fluorescencja, natomiast do oznaczeń diagnostycznych stosuje się przeciwciała IHC, monoklonalne i poliklonalne.
ZAWARTOŚĆ
1. Omówienie i kluczowe różnice
2. Czym jest immunocytochemia
3. Czym jest immunohistochemia
4. Podobieństwa między immunocytochemią a immunohistochemią
5. Porównanie obok siebie - immunocytochemia a immunohistochemia w formie tabelarycznej
6. Podsumowanie
Co to jest immunocytochemia (ICC)?
ICC wykorzystuje przeciwciała pierwotne i wtórne związane z markerami, takimi jak markery fluorescencyjne lub enzymy, i jest skuteczną metodą wykrywania do wykrywania antygenów obecnych na komórkach docelowych, którymi mogą być zakaźne cząstki komórkowe lub komórki nowotworowe. Do immunocytochemii wymagane są trzy rodzaje kontroli.
- Primary Antibody - kontrola, która pokazuje swoistość wiązania pierwotnego przeciwciała z antygenem
- Secondary Antibody - kontrola pokazująca, że znacznik jest specyficzny dla pierwotnego przeciwciała
- Kontrola etykiet - pokaż, że oznakowanie jest wynikiem dodania etykiety, a nie wynikiem etykietowania endogennego.
Rysunek 01: Immunocytochemia znakuje poszczególne białka w komórkach (tutaj hydroksylaza tyrozynowa w aksonach współczulnych neuronów autonomicznych jest pokazana na zielono).
Pierwszorzędowa kontrola przeciwciał jest specyficzna dla każdego nowego przeciwciała i nie może być powtarzana dla każdego eksperymentu. Drugorzędowa kontrola przeciwciał jest zaprojektowana na podstawie pierwszorzędowego przeciwciała wykorzystywanego w eksperymencie i jest dołączana do każdego doświadczenia. Kontrola etykietowania jest uwzględniana, jeśli zmieni się warunek procedury, próbka zostanie zmieniona lub jeśli zostanie znalezione nieoczekiwane etykietowanie.
Dwa główne zastosowania ICC to Radio Immuno - Assay (RIA) i Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Najczęściej stosowanym przeciwciałem jest immunoglobulina G.
Co to jest immunohistochemia (IHC)?
W immunohistochemii próbka źródłowa zawiera przeciwciała monoklonalne i poliklonalne w celu określenia obecności antygenów w obcych komórkach. Technika ta opiera się na specyficznej reakcji wiązania antygenu z przeciwciałem. Przeciwciała stosowane do wykrywania można znakować różnymi markerami; mogą to być markery fluorescencyjne, znaczniki radioznakowane lub markery chemiczne. Poprzez ułatwienie wiązania in vitro między antygenem a docelowym przeciwciałem można określić obecność lub brak określonego białka komórki.
Rysunek 02: Immunohistochemiczne barwienie prawidłowej nerki za pomocą CD10
Obecnie naukowcy zajmują się opracowywaniem przeciwciał docelowych dla określonych antygenów obecnych w komórkach, które mogą rozwinąć się jako złośliwe komórki nowotworowe lub antygeny obecne w czynnikach zakaźnych, takich jak HIV.
Jakie są podobieństwa między immunocytochemią a immunohistochemią?
- Reakcje są wysoce specyficzne i dokładne w ICC i IHC.
- Zastosowania ICC i IHC obejmują diagnostykę nowotworów i chorób zakaźnych.
- W obu warunkach należy zachować jałowość i wykonywać je in vitro
- Obie techniki zapewniają powtarzalne wyniki.
- Obie są szybkie.
- Znakowanie radiowe i techniki fluorescencyjne są stosowane jako metody wykrywania zarówno w ICC, jak i IHC.
- Obie opierają się na parowaniu antygen-przeciwciało.
Jaka jest różnica między immunocytochemią a immunohistochemią?
Porównaj środek artykułu przed tabelą
Immunocytochemia (ICC) a immunohistochemia (IHC) |
|
| ICC wykorzystuje pierwotne i wtórne markery związane z przeciwciałami, takie jak markery fluorescencyjne lub enzymy i jest skuteczną metodą wykrywania do wykrywania antygenów obecnych na komórkach docelowych. | IHC to metoda wykorzystująca przeciwciała monoklonalne i poliklonalne do określenia obecności antygenów, które są specjalnymi markerami białkowymi umieszczanymi na powierzchni komórek. |
| Przykładowe źródło | |
| W ICC wykorzystuje się próbki pobrane z tkanek, które zostały poddane histologicznemu przetworzeniu na cienkie skrawki. | IHC wykorzystuje próbki składające się z komórek wyhodowanych w monowarstwie lub komórek w zawiesinie, które są osadzane na szkiełku. |
| Przetwarzanie próbki | |
| W ICC komórki powinny być przepuszczalne, aby ułatwić penetrację przeciwciał do celów wewnątrzkomórkowych. | W IHC komórki utrwala się w formalinie, zatapia w parafinie przed barwieniem. |
Podsumowanie - Immunocytochemia a immunohistochemia
Diagnostyka molekularna służy do identyfikacji i potwierdzania występowania zarówno chorób niezakaźnych, jak i zakaźnych na podstawie markerów molekularnych obecnych na komórkach. Markery molekularne mogą być białkami lub sekwencjami DNA lub RNA; Rozwój technologii, takich jak ICC i IHC, utorował naukowcom drogę do zidentyfikowania choroby i jej przyczyny na wczesnym etapie. Zarówno ICC, jak i IHC zależą od specyficznych reakcji między przeciwciałem a antygenem, pomimo źródła próbki. Główną różnicą między immunocytochemią a immunohistochemią jest obróbka próbki w ramach dwóch procedur.
Pobierz wersję PDF Immunocytochemistry vs Immunohistochemistry
Możesz pobrać wersję PDF tego artykułu i używać jej w trybie offline, zgodnie z notą cytowania. Proszę pobrać wersję PDF tutaj Różnica między immunocytochemią a immunohistochemią.
