Kluczowa różnica - Cytometria przepływowa a FACS
W kontekście teorii komórki komórki są podstawową jednostką strukturalną i funkcjonalną wszystkich organizmów żywych. Sortowanie komórek to metodologia stosowana do rozdzielania różnych komórek zgodnie z cechami fizjologicznymi i morfologicznymi. Mogą mieć cechy wewnątrzkomórkowe lub zewnątrzkomórkowe. Interakcje DNA, RNA i białek są uważane za wewnątrzkomórkowe właściwości interaktywne, podczas gdy kształt, rozmiar i różne białka powierzchniowe są uważane za właściwości zewnątrzkomórkowe. We współczesnej nauce metodologie sortowania komórek pomogły w różnych badaniach biologicznych, a także w ustanowieniu nowych zasad poprzez badania medyczne. Sortowanie komórek odbywa się według różnych metodologii, które obejmują zarówno prymitywne z mniejszym wyposażeniem, jak i zaawansowane metodologie technologiczne z wykorzystaniem zaawansowanych maszyn. Cytometria przepływowa, sortowanie komórek aktywowanych fluorescencyjnie (FACS), selekcja komórek magnetycznych i sortowanie pojedynczych komórek to główne stosowane metodologie. Cytometria przepływowa i FACS zostały opracowane w celu różnicowania komórek na podstawie ich właściwości optycznych. FACS to specjalistyczny rodzaj cytometrii przepływowej. Cytometria przepływowa jest metodologią wykorzystywaną podczas analizy heterogenicznej populacji komórek pod kątem różnych cząsteczek powierzchniowych, wielkości i objętości, która umożliwia badanie pojedynczych komórek. FACS to proces, w którym mieszanina próbek komórek jest sortowana zgodnie z ich charakterystyką rozpraszania światła i fluorescencji do dwóch lub więcej pojemników. To jest kluczowa różnica między cytometrią przepływową a FACS.
ZAWARTOŚĆ
1. Przegląd i kluczowe różnice
2. Czym jest cytometria przepływowa
3. Co to jest FACS
4. Podobieństwa między cytometrią przepływową a FACS
5. Porównanie obok siebie - cytometria przepływowa vs FACS w formie tabelarycznej
6. Podsumowanie
Co to jest cytometria przepływowa?
Cytometria przepływowa to metoda stosowana do badania i określania ekspresji cząsteczek wewnątrzkomórkowych i powierzchni komórki oraz do definiowania i charakteryzowania różnych typów komórek. Służy również do określania objętości i rozmiaru komórek oraz do oceny czystości izolowanych subpopulacji. Pozwala to na wieloparametrową ocenę pojedynczych komórek w mniej więcej tym samym czasie. Cytometria przepływowa jest wykorzystywana do pomiaru intensywności fluorescencji, która jest wytwarzana przez wyznakowane fluorescencyjnie przeciwciała, które pomagają zidentyfikować białka lub ligandy, które wiążą się z powiązanymi komórkami.
Rysunek 01: Cytometria przepływowa
Ogólnie cytometria przepływowa obejmuje głównie trzy podsystemy. Są to układy strumieniowe, elektronika i optyka. W cytometrii przepływowej dostępnych jest pięć głównych składników, które są wykorzystywane do sortowania komórek. Są to ogniwo przepływowe (strumień cieczy, który jest używany do ich transportu i ustawiania ogniw w procesie wykrywania optycznego), system pomiaru (może składać się z różnych systemów, w tym lamp rtęciowych i ksenonowych, chłodzonych wodą lub chłodzone powietrzem lasery małej mocy lub lasery diodowe), ADC; Układ przetwornika analogowo-cyfrowego, układ wzmacniający i komputer do analizy. Akwizycja to proces, w którym dane są zbierane z próbek za pomocą cytometru przepływowego. W procesie tym pośredniczy komputer połączony z cytometrem przepływowym. Oprogramowanie obecne w komputerze analizuje informacje podawane do komputera z cytometru przepływowego. Oprogramowanie posiada również możliwość dostosowania parametrów eksperymentu sterującego cytometrem przepływowym.
Co to jest FACS?
W kontekście cytometrii przepływowej sortowanie komórek aktywowane fluorescencją (FACS) jest metodą, która jest wykorzystywana do różnicowania i sortowania próbki mieszaniny komórek biologicznych. Komórki są oddzielone od dwóch lub więcej kontenerów. Metoda sortowania opiera się na cechach fizycznych komórki, które obejmują rozpraszanie światła i charakterystykę fluorescencji komórki. Jest to ważna technika naukowa, którą można wykorzystać do uzyskania wiarygodnych ilościowych i jakościowych wyników sygnałów fluorescencyjnych emitowanych przez każdą komórkę. Podczas FACS, początkowo, wstępnie otrzymana mieszanina komórek; zawiesina jest kierowana na środek wąskiego strumienia cieczy, która szybko przepływa. Przepływ cieczy ma na celu oddzielenie komórek w zawiesinie na podstawie średnicy każdej komórki. Na strumień zawiesiny zostaje zastosowany mechanizm wibracji, w wyniku którego powstają pojedyncze kropelki.
Rysunek 02: FACS
System jest skalibrowany w celu stworzenia pojedynczej kropli z jedną komórką. Tuż przed utworzeniem się kropelek zawiesina przepływowa porusza się wzdłuż aparatu do pomiaru fluorescencji, który wykrywa charakterystykę fluorescencji każdej komórki. W miejscu tworzenia się kropelek umieszcza się elektryczny pierścień ładujący, którego ładunek jest wprowadzany do pierścienia przed pomiarem intensywności fluorescencji. Gdy kropelki utworzą się ze strumienia zawiesiny, ładunek jest uwięziony w kropelkach, które następnie wchodzą do układu odchylania elektrostatycznego. Zgodnie z opłatą system kieruje kropelki do różnych pojemników. Metoda naliczania opłaty różni się w zależności od różnych systemów wykorzystywanych w FACS. Sprzęt używany w FACS jest znany jako sorter komórek aktywowany fluorescencją.
Jakie jest podobieństwo między cytometrią przepływową a FACS?
Cytometria przepływowa i FACS zostały opracowane w celu różnicowania komórek na podstawie ich właściwości optycznych
Jaka jest różnica między cytometrią przepływową a FACS?
Porównaj środek artykułu przed tabelą
Cytometria przepływowa a FACS |
|
| Cytometria przepływowa jest metodologią wykorzystywaną podczas analizy heterogenicznej populacji komórek pod kątem różnych cząsteczek powierzchniowych, wielkości i objętości, która umożliwia badanie pojedynczych komórek. | FACS to proces, w którym mieszanina próbek komórek jest sortowana zgodnie z ich charakterystyką rozpraszania światła i fluorescencji do dwóch lub więcej pojemników. |
Podsumowanie - Cytometria przepływowa a FACS
Komórka jest podstawową strukturą i funkcjonalną jednostką wszystkich żywych organizmów. Sortowanie komórek to proces, w którym komórki są izolowane i różnicowane na różne kategorie w oparciu o ich właściwości wewnątrzkomórkowe i zewnątrzkomórkowe. Cytometria przepływowa i FACS to dwie ważne metodologie sortowania komórek. Oba procesy zostały opracowane w celu różnicowania komórek na podstawie ich właściwości optycznych. Cytometria przepływowa jest metodologią wykorzystywaną podczas analizy heterogenicznej populacji komórek pod kątem różnych cząsteczek powierzchniowych, wielkości i objętości, która umożliwia badanie pojedynczych komórek. FACS to proces, w którym mieszanina próbek komórek jest sortowana zgodnie z ich charakterystyką rozpraszania światła i fluorescencji do dwóch lub więcej pojemników. Na tym polega różnica między cytometrią przepływową a FACS.
Pobierz wersję PDF cytometrii przepływowej vs FACS
Możesz pobrać wersję PDF tego artykułu i używać jej w trybie offline, zgodnie z notą cytowania. Proszę pobrać wersję PDF tutaj Różnica między cytometrią przepływową a FACS
